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MEDUSA 96道移液器在磁珠法质粒DNA提取中的应用
点击次数:6154 发布日期:2012-5-22  来源:德淙科仪
MEDUSA 96道移液器在磁珠法质粒DNA提取中的应用
 
MagPure Plasmid Mini Kit 操作流程
准备工作
 ●  96 道移液枪 MEDUSA96
 
 ●  IKA MS3 96 孔振荡仪
 ●  96 孔深孔盘
 ●  96 孔板磁力架  
 ●  96 孔板离心机 Hettich 320  
 ●  MAGEN MagPure Plasmid Mini Kit 质粒提取试剂盒 
 
操作流程
 
1.  在96孔盘中按标准流程培养1.2ml细菌菌液到合适的浓度。(本实验中,为验证本方法对每个样品的平行性,采用培养250ml菌液,然后用96 道移液枪转移1ml到每个孔中)
2.  2,000 x g离心 5 分钟收集细菌,倒弃培养液。
3.  用96 道移液枪转移170ul Buffer P1/Rnase A至细菌沉淀团中。放置在振荡仪上,1500-2000rpm振荡 1-2 分钟充分重悬细菌。
4.  用 96 道移液枪转移 170ul Buffer P2 至细菌重悬液中。放置在振荡仪上,300-600rpm振荡混匀3 分钟裂解细菌。
5.  用 96 道移液枪转移 170ul Buffer N3 至细菌裂解液中。放置在振荡仪上,300-600rpm振荡混匀5 分钟中和。
6.  放到离心机中。4000-4700g离心 15 分钟沉淀去除杂质。
7.  小心取出96 孔板, 放置在 96 道移液移液枪的平台中。 调整好移移枪插入的深度, 吸取450ul上清液至新的96 孔反应板中。(若沉淀较多,可只转移 400ul)
8.  用 96 道移液枪加入 0.5 倍体积的磁珠结合液(Bind Beads)至样品中。放置在振荡仪上,1000-1200rpm振荡混匀1 分钟。室温静置 10 分钟 (处理低拷贝数的质粒2-8 ℃放置过夜) 。
9.  放置在磁力架上吸附磁珠5 分钟。用 96 道移液枪吸弃废液(吸取800ul以上)。
10. 用 96 道移液枪每孔加入600ul 70%乙醇至每一个孔中。放置在振荡仪上 1000-1200rpm振荡混匀1 分钟。
11. 放置在磁力架上吸附磁珠3 分钟。用 96 道移液枪吸弃废液(吸取650ul以上)。
12. 用 96 道移液枪每孔加入200ul 70%乙醇。放置在振荡仪上 1000-1200rpm振荡混匀1 分钟。
13. 放置在磁力架上吸附磁珠 3 分钟。用 96 道移液枪吸弃废液(吸取250ul以上)。
14. 室温干燥20 分钟。
15. 用 96 道移液枪每孔加入50-100ul灭菌水(Elution Buffer),放置在振荡仪上 1200-2000rpm振荡混匀2 分钟。
16. 放置在磁力架上吸附磁珠3 分钟。用 96 道移液枪转移质粒溶液至新的 96 孔板中。
 
 
MEDUSA96接受试用申请,请浏览我们申请页面:
http://www.biomart.cn/infosupply/4028e4e6342100210134214552dd00b4.htm?tryId=477
来源:佛山市德淙科学仪器有限公司
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